广州股票配资平台【凤采鸾章·博文集】组蛋白乳酸化调控USP7转录促进肺癌恶性进展及顺铂耐药的作用研究

组蛋白乳酸化调控USP7转录促进肺癌恶性进展及顺铂耐药的作用研究

Effect of histone lactation on USP7 transcription in

promoting malignant progression of lung cancer and cisplatin resistance

吴海永1，任瑾卓1*，宫志鹏2，张雁1，张华2

(1. 河北省张家口市第一医院胸外科，河北张家口 075000；2. 河北省张家口市第一医院呼吸内科，河北张家口 075000)

引用

吴海永, 任瑾卓, 宫志鹏, 等. 组蛋白乳酸化调控 USP7转录促进肺癌恶性进展及顺铂耐药的作用研究[J]. 世界临床药物, 2025, 46(8): 764-772. DOI：10.13683/j.wph.2025.08.005.

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作者简介

基金课题：张家口市重点研发计划项目卫生健康和生物医疗专项(2322126D)

作者简介：吴海永，副主任医师，研究方向：肺癌的诊疗。

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通信作者：任瑾卓，副主任医师，研究方向：肺癌的诊疗。

摘要

目的探讨组蛋白乳酸化修饰在肺癌细胞恶性生物学行为及顺铂耐药中的作用及分子机制。

方法采用免疫印迹法检测肺癌组织及细胞中泛赖氨酸乳酸化(Pan-Kla) 和组蛋白乳酸化位点修饰水平；利用2- 脱氧-D- 葡萄糖(2-deoxy-D-glucose，2-DG) 处理A549 和A549/DDP 细胞，通过CCK-8 法、Transwell 实验、流式细胞术及免疫印迹法分析细胞增殖、迁移、凋亡及耐药性相关指标。结合转录组测序筛选H3K18la 下游靶基因，通过染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation，ChIP) 验证结合关系，并采用实时荧光定量聚合酶链反应检测泛素特异性蛋白酶(ubiquitin specific protease，USP)7 表达水平；进一步研究USP7 对肺癌细胞生物学行为及顺铂耐药的影响。

结果肺癌组织及细胞中Pan-Kla 及H3K18la 乳酸化修饰显著升高；2-DG 处理后，A549 和A549/DDP 细胞的Pan-Kla 及H3K18la 水平呈剂量依赖性降低(P ＜ 0.01)，同时2-DG组细胞增殖、迁移受到抑制，凋亡率升高，A549/DDP 细胞耐药性半抑制浓度降低(P ＜ 0.05)。ChIP 证实H3K18la 富集于USP7 启动子区并促进其转录；肺癌中USP7 表达上调，敲低USP7 可抑制细胞增殖迁移，促进凋亡，并降低耐药相关蛋白表达(P ＜ 0.01)。USP7 过表达可部分逆转2-DG 的抑制作用。

结论肺癌中组蛋白乳酸化修饰，特别是H3K18la，通过上调USP7 表达，促进恶行生物学行为及顺铂耐药，参与肺癌进展。

关键词

肺癌；组蛋白乳酸化修饰；泛素特异性蛋白酶7 ；恶性生物学；顺铂耐药

章节导览

1 材料与方法

1.1 实验细胞

1.2 主要试剂和仪器

1.3 方法

1.3.1 细胞转染及分组

1.3.2 免疫印迹法检测

1.3.3 CCK-8 法测定细胞增殖活性及半数抑制浓度

(50% inhibitory concentration，IC50)

1.3.4 Transwell 细胞迁移实验

1.3.5 流式细胞术测定细胞凋亡

1.3.6 信使(messenger，m)RNA 测序(RNA sequencing，RNA-Seq)

1.3.7 染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation，ChIP) 检测

1.3.8 实时(realtime，RT)-qPCR 检测USP7 mRNA水平

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 肺癌中组蛋白乳酸化修饰水平检测

2.2 组蛋白乳酸化对肺癌细胞生物学行为及顺铂耐药的作用

2.3 H3K18la 乳酸化对肺癌细胞中USP7 转录的调控

2.4 敲低USP7 对肺癌细胞生物学行为及顺铂耐药的作用

2.5 组蛋白乳酸化调控USP7 对肺癌进展及顺铂耐药的影响

3 讨论

文章节选

目前化疗仍是肺癌临床治疗的主要手段，但多药耐药问题严重制约其疗效。研究肺癌化疗耐药机制、提高化疗敏感性成为临床关注重点。近年研究表明，组蛋白修饰失调会通过改变转录激活/抑制平衡改变参与疾病发生、发展，是重要的功能标记。乳酸化修饰作为最新发现的由乳酸介导的组蛋白翻译后修饰，在胚胎发育、细胞代谢、基因调控及肿瘤发生中具有重要作用，且有研究证实其参与肿瘤耐药调控。泛素特异性蛋白酶(ubiquitin specific protease，USP)7 作为去泛素化关键分子，已被证实参与肺癌发生、发展，但其在耐药中的作用及与组蛋白乳酸化的关联尚不明确。本研究拟探讨组蛋白乳酸化修饰及USP7 在肺癌进展及耐药中的作用机制，以期为肺癌治疗新靶点开发提供理论依据。